牛血清富含細胞生長必要的因子，但牛血清在生產(chǎn)制作中也存在引入外源因子的風險。所以在遵循牛血清生產(chǎn)的GMP規(guī)范也要對其做全面的質(zhì)控檢測。

外源因子主要包括微生物、內(nèi)毒素和病毒抗體等。

01、微生物

1. 細菌和真菌

其中細菌又分為需氧菌和厭氧菌。

這兩種微生物的檢查又稱為“無菌檢查”。現(xiàn)多采用培養(yǎng)法。我國藥典通則1101和美國藥典USP<71>有關(guān)于無菌檢查方法的說明。

牛血清在生產(chǎn)過程中，經(jīng)0.22mm孔徑的濾膜過濾，可*祛除細菌和真菌，因其大?。?/span>1mm。

2. 支原體

支原體大小介于0.1mm~0.3mm

牛血清在生產(chǎn)過程中，經(jīng)0.1mm孔徑的濾膜三次過濾，可*祛除支原體。

支原體檢查也采用培養(yǎng)法，可參看我國藥典通則3301和美國藥典USP<63>

3. 病毒

病毒檢查包括細胞培養(yǎng)法及熒光抗體檢測。細胞培養(yǎng)法包括細胞病變效應(yīng)和血吸附檢查。檢測多為導致牛常見傳染病的病毒，如牛副流感病毒3 型（PI3)、牛腺病毒（BAV-3 ) 、牛細小病毒（BPV ) 以及牛病毒性腹瀉病毒（BVD)等。其中，BVD以其發(fā)病率高，亞型不具有細胞病變效應(yīng)而尤其受到重視。

02、內(nèi)毒素

內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌的細胞壁成分，主要為脂多糖。內(nèi)毒素對細胞產(chǎn)生刺激，直接導致細胞凋亡，因此內(nèi)毒素被用來進行血清評級。特級胎牛血清內(nèi)毒素要求≤10EU/ml。但內(nèi)毒素濃度越低越好，尤其是對于一些“嬌氣”的細胞。

內(nèi)毒素的檢測是采用鱟試劑法。

03、病毒抗體

動物感染病毒后，會刺激機體產(chǎn)生抗體。感染治愈后，抗體會長期存在。病毒抗體會影響疫苗細胞苗的毒價。如豬瘟細胞苗的生產(chǎn)，就不能用含BVD抗體的牛血清，因該抗體與豬瘟病毒抗原之間會發(fā)生特異性交叉反應(yīng)。2020版中國藥典也規(guī)定用于乙腦疫苗生產(chǎn)的新生牛血清，應(yīng)為乙腦抗體陰性。